Clin Osteol 2026; 31(1): 45-48 | DOI: 10.36290/clo.2026.006

Optimalizovaný protokol pro izolaci RNA a mikroRNA z lidské mineralizované kostní tkáně krčku femuruPůvodní práce

Květa Vrablíková¹, Marcela Slavíčková¹, Helena Párová¹, Petr Hoza^{1, 2}

¹ Ústav klinické biochemie a diagnostiky LF UK a FN Hradec Králové

² Ortopedické oddělení, Pardubická nemocnice, Pardubice

Nízkotraumatické zlomeniny proximálního femuru patří k nejzávažnějším komplikacím osteoporózy. MikroRNA jsou klíčovými regulátory kostní remodelace a buněčné senescence, avšak izolace kvalitní RNA z mineralizované kostní tkáně je technicky náročná a často nedostatečně standardizovaná. Cílem práce bylo vyvinout a optimalizovat reprodukovatelný protokol pro odběr a zpracování biopsií krčku femuru získaných při totální endoprotéze kyčelního kloubu, umožňující izolaci celkové RNA včetně nízkomolekulární frakce (< 200 nt) a následnou cílenou analýzu exprese specifických mikroRNA.

Do studie bylo zařazeno 46 pacientů (21 osteoporotická fraktura, 25 osteoartróza). Vzorky byly bezprostředně po odběru stabilizovány v QIAzol Lysis Reagent (QIAGEN), homogenizovány (MagNA Lyser 90 s, 7 000 × g; dle potřeby + 30 s) a RNA byla izolována pomocí miRNeasy Mini Kit. RNA se podařilo izolovat u 44/46 pacientů (96 %). Koncentrace RNA byla vyšší u pacientů s frakturami než u pacientů s osteoartrózou (227,9 ± 158,3 vs. 95,8 ± 81,8 ng/µl; p = 0,0016). Protokol poskytuje spolehlivý metodický základ pro molekulární analýzy v lidské kostní tkáni.

Klíčová slova: izolace RNA, mikroRNA, biopsie krčku femuru.

Přijato: 25. březen 2026; Zveřejněno: 30. březen 2026  Zobrazit citaci